基因改造是指从一种生物取出某个基因,插入另一种生物,使受体制造有用的蛋白质或获得有用的特征。考试要求你概述各个阶段,并解释每一阶段为什么需要。它不要求实验室方法。
这一课建立在细胞分裂与遗传之上,因为你需要知道基因带有制造一种蛋白质的指令。
用简单的话说,这个想法是什么?
基因是 DNA 的一段,带有制造蛋白质的指令。所有生物读取这些指令的基本方式相同,所以细菌细胞可以按照人类基因来制造人类蛋白质。
基因改造就是利用这一点。找到有用的基因,把它转移过去,让受体的细胞完成其余工作。
有哪些阶段?
经典例子是制造人类胰岛素的细菌。胰岛素是某些类型糖尿病患者需要的蛋白质。阶段如下:
| 阶段 | 发生什么 | 原因 |
|---|---|---|
| 1. 确定 | 找到人类胰岛素基因 | 需要准确的指令 |
| 2. 切割 | 限制酶切下基因,同时切开细菌质粒 | 酶在特定位置切断 DNA |
| 3. 连接 | 另一种酶(连接酶)把基因接进质粒 | 质粒现在带有这个基因 |
| 4. 转移 | 把质粒放进细菌细胞 | 细菌是新的宿主 |
| 5. 培养 | 大量培养细菌 | 每个细胞分裂并复制基因 |
| 6. 收集 | 细菌制造胰岛素,再分离并提纯 | 产品才是有用的 |
**质粒(plasmid)**是细菌中的一小环 DNA。在这里它充当载体(vector),即把基因送进去的运载工具。
例题
问题: 一位科学家希望细菌制造一种叫蛋白质 X 的人类蛋白质。概述如何做到,并解释为什么细菌适合。
步骤 1,确定目标。 找出蛋白质 X 的人类基因。
步骤 2,切割和连接。 用限制酶把它切下来,再用连接酶接进质粒。
步骤 3,转移和培养。 质粒被细菌细胞吸收,再大量培养这些细胞。
步骤 4,表达。 细菌读取基因并制造蛋白质 X,然后收集。
步骤 5,解释适合的原因。 细菌繁殖很快,所以有大量基因拷贝,蛋白质供应也快。它们体积小,容易在受控容器中培养,而且因为遗传密码是通用的,它们能读懂人类基因。
要留意的错误
错误答案: “细菌被给予胰岛素,所以能制造更多胰岛素。”
这把基因和产物混为一谈了。细菌得到的是胰岛素的基因,然后细菌自己的核糖体依照该基因的指令制造蛋白质。
纠正方法是写出这条链:“基因 → 指令 → 由宿主制造的蛋白质”,并检查 DNA 被转移的地方用的是“基因”,产物被制造的地方用的是“蛋白质”。
自我检测
1. 说明限制酶和连接酶在上述概述中的作用。
显示答案
限制酶在特定位置切断 DNA(取出基因并切开质粒)。连接酶把基因接进质粒。
2. 为什么质粒被称为载体?
显示答案
它把基因带进细菌细胞,所以充当运载工具。
3. 一位学生写“人类胰岛素被注射进细菌”。请改正这句话。
显示答案
应该是人类胰岛素的基因被插入细菌,细菌随后制造胰岛素蛋白质。
接下来学什么
在区分基因插入与选择性育种中,把这种方法与传统育种作比较,也可以用遗传模型板在虚构的等位基因上测试这些想法。本模块较早的发酵一课展示了微生物的大规模培养。
如果概述仍然杂乱,一对一生物线上补习能让老师和你一起读草稿,并标出这条链在哪里断开。